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什么是凍干試劑管,制備凍干管的過(guò)程操作您知道多少?

更新時(shí)間:2023-07-07    點(diǎn)擊次數(shù):4494

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  制備凍干管的操作步驟是什么?

  1.安瓿管準(zhǔn)備

  安瓿管材料以中性玻璃為宜。清洗安部管時(shí),先用2%鹽酸浸泡過(guò)夜,自來(lái)水沖洗干凈后,用蒸餾水浸泡至pH中性,干后、貼上標(biāo)簽,標(biāo)上菌號(hào)及時(shí)間,加入脫脂棉塞后,121℃下高壓滅菌15-20分鐘,備用。

  2.保護(hù)劑的選擇和準(zhǔn)備

  保護(hù)劑種類(lèi)要根據(jù)微生物類(lèi)別選擇。配制保護(hù)劑時(shí),應(yīng)注意其濃度及 pH值,以及滅菌方法。如血清,可用過(guò)濾滅菌;牛奶要先脫脂,用離心方法去除上層油脂,一般在100℃間歇煮沸2-3次,每次10-30分鐘,備用。

  3.凍干樣品的準(zhǔn)備

  在最適宜的培養(yǎng)條件下將菌種培養(yǎng)至靜止期或成熟期,進(jìn)行純度檢查后,與保護(hù)劑混合均勻,分裝。微生物培養(yǎng)物濃度以細(xì)胞或孢子不少于 108-1010個(gè)ml為宜(以大腸桿菌為例,為了取得每毫升1010個(gè)活細(xì)胞菌液2毫升-2.5毫升,只需10毫升瓊脂斜面兩支)。

  4.預(yù)凍

  般預(yù)凍2小時(shí)以上,溫度達(dá)到-20℃到-35℃左右。

  5.冷凍干燥

  采用冷凍干燥機(jī)進(jìn)行冷凍干燥。

  將冷凍后的樣品安部管置于冷凍干燥機(jī)的干燥箱內(nèi),開(kāi)始冷凍干燥,時(shí)間一般為8-20小時(shí)。

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